安徽农业科学

2017, v.45;No.542(01) 139-142

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鸡MHCⅠ分子单链三聚体真核表达载体的构建和表达
Construction and Expression of Single Chain Trimer of Chicken MHCⅠMolecular

戴银;单文杰;胡晓苗;赵瑞宏;侯宏艳;沈学怀;潘孝成;周学利;张丹俊;

摘要(Abstract):

[目的]探索主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(Major Histocompatibility Complex,MHCⅠ)提高抗原呈递效率的方法,获得具有免疫学活性的抗原肽-MHCⅠ分子单链三聚体。[方法]采用基因重组技术,通过连接肽(G4S)3将鸡新城疫病毒抗原表位短肽HN(aa346-353)与鸡MHCⅠ(B-F)分子二聚体的编码基因共价串联,构建带有绿色荧光标签蛋白的真核表达载体p EGFP-HN_(346-353)-B-Fβ2m-α。[结果]转染真核细胞293T后,荧光显微镜观察可见,重组融合蛋白HN_(346-353)-B-Fβ2m-α分子三聚体主要表达定位于真核细胞的内膜系统。Western Blot结果表明,在预期蛋白分子量大小位置有明显的特异反应带,重组蛋白与其相应抗体可发生特异性结合反应。[结论]重组质粒能够在真核细胞中表达,且融合蛋白具有良好的生物学活性。

关键词(KeyWords): 鸡MHC B-F分子;单链三聚体;真核表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(31302044);; 国家蛋鸡产业技术体系项目(CARS-41);; 安徽省科技攻关项目(11010302119)

作者(Author): 戴银;单文杰;胡晓苗;赵瑞宏;侯宏艳;沈学怀;潘孝成;周学利;张丹俊;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2017.01.046

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