安徽农业科学

2010, v.38;No.309(20) 10543-10546+10574

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棉铃虫核型多角体病毒G4株Ha99蛋白的原核表达和orf99敲除回复子的构建
Prokaryotic Expression of Ha99 and Struction of orf99's Deletion and Revertant in Helicoverpa armigera Single Nucleocapsid Nucleopolyhedrovirus G4

钱丽莹;闫尧;曾利平;徐旭士;

摘要(Abstract):

[目的]探索棉铃虫核型多角体病毒G4株Ha99蛋白的最佳表达条件。[方法]采用PCR从其基因组中扩增出orf99编码区,将其克隆到pGEM-Teasy载体,测序后将其亚克隆到原核表达载体pGEX-KG,转化大肠杆菌BL21加入IPTG诱导融合表达。并在orf99缺失杆粒HaBac△99的基础上构建了orf99敲除子HaBac-KO99及回复子HaBac-Rep99。[结果]SDS-PAGE分析表明,GST-Ha99融合蛋白得到成功表达,Westernblot进一步分析表明融合蛋白已得到成功表达。此外,PCR及酶切验证各载体构建成功。[结论]为orf99功能的进一步研究奠定基础。

关键词(KeyWords): 棉铃虫核型多角体病毒;SDS-PAGE;Western blot;缺失

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 钱丽莹;闫尧;曾利平;徐旭士;

Email:

DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.20.074

参考文献(References):

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