安徽农业科学

2010, v.38;No.302(13) 6663-6665+6705

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银杏HDR基因的克隆与功能分析
Cloning and Functional Analysis of HDR Gene from Ginkgo biloba L.

杨颖舫;杨春贤;冯国庆;成瑜;李郑娜;陈敏;廖志华;

摘要(Abstract):

[目的]获得银杏HDR基因的克隆并研究HDR基因的功能。[方法]采用RT-PCR技术获得银杏HDR的全长cDNA,命名为Gb-HDR(GenBank登录号:DQ364231),该基因cDNA全长为1827bp,包含1425bp的开放阅读框,编码474个氨基酸残基的蛋白;并构建GbHDR的原核表达载体pTrcGbHDR,与原核表达载体pAC-BETA共转入大肠杆菌XL1-Blue,获得β-胡萝卜素工程菌。[结果]克隆获得实际长度为1441bp的GbHDR基因,该序列包含1425bp的HDR基因ORF,编码474个氨基酸残基的蛋白,其预测分子量为53.2kD,等电点预测为5.76。功能互补分析表明,GbHDR能推动工程菌XL1-Blue+pTrcGbHDR+pAC-BETA超量表达β-胡萝卜素,在颜色互补平板上呈现β-胡萝卜素特有的橘黄色,证实GbHDR具有典型的HDR基因功能。[结论]获得1株可高量积累β-胡萝卜素的大肠杆菌工程菌,为最终实现β-胡萝卜素代谢工程提供侯选基因和作用靶点。

关键词(KeyWords): HDR基因;基因克隆;β-胡萝卜;功能互补;银杏

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30500303)

作者(Author): 杨颖舫;杨春贤;冯国庆;成瑜;李郑娜;陈敏;廖志华;

Email:

DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.13.128

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