安徽农业科学

2010, v.38;No.298(09) 4604-4606+4613

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脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞条件的优化
Optimization of Parameters of Exogenous Gene Transfection of Yak Mammary Epithelial Cells in vitro Mediated by Liposome

田甜;李键;王中乾;

摘要(Abstract):

[目的]优化脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞的条件。[方法]通过胶原酶消化法和组织块贴壁法,体外分离培养得到牦牛乳腺上皮细胞。采用免疫细胞化学技术检测细胞角蛋白在细胞内的表达。以绿色荧光蛋白为报告基因,通过脂质体介导外源基因转染牦牛乳腺上皮细胞,统计在不同细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间下的转染效率,寻求最佳转染条件。[结果]牦牛乳腺上皮细胞在细胞融合度为81%~90%,脂质体的量为1.8μl,脂质体与质粒比例为2∶1,转染时间为4h时,转染效率最高。[结论]该研究可为乳腺生物反应器构建提供试验依据。

关键词(KeyWords): 牦牛乳腺上皮细胞;免疫细胞化学;转染

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(30771550)

作者(Author): 田甜;李键;王中乾;

Email:

DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.09.117

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