安徽农业科学

2010, v.38;No.312(23) 12337-12340

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抗黄瓜花叶病毒RNAi载体的构建及烟草的转化
Construction of RNAi Vector which Resist Cucumber Mosaic Virus and Transformation of Tobacco

张瑜;郑银英;赵峰玉;乔亚红;崔百明;向本春;

摘要(Abstract):

[目的]构建抗黄瓜花叶病毒RNAi载体,并将载体转入烟草。[方法]采用RT-PCR方法,扩增黄瓜花叶病毒NS04加工番茄分离物的RNA2基因组的序列。选取CMVRAN2基因组中的复制酶片段作为靶序列,构建pBi35SCR2真核表达载体,并对表达载体进行鉴定;通过农杆菌介导的方法将表达载体转入烟草,用PCR的方法检测载体是否转入。[结果]系统进化树分析结果表明,RNA2中编码CMV-2a的序列与中国浙江的DQ412731分离物有较高核苷酸及氨基酸同源性,分别达到98.0%和96.5%;PCR结果表明,试验成功构建了pBi35SCR2真核表达载体,并成功将表达载体转入烟草。[结论]试验获得的转基因烟草可作为后期攻毒试验的材料,并为研究加工番茄抗黄瓜花叶病毒奠定了基础。

关键词(KeyWords): 黄瓜花叶病毒;同源性;RNAi载体;烟草;转化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国际科技合作项目(2008DFA30560);; 973计划前期研究专项(2008CB117018);; 石河子大学高层次人才科研启动项目(RCZX200732)

作者(Author): 张瑜;郑银英;赵峰玉;乔亚红;崔百明;向本春;

Email:

DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.23.193

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