安徽农业科学

2017, v.45;No.569(28) 144-145

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苜蓿二胺氧化酶(DAO)的分离纯化
Separation and Purification of Diamine Oxidase from Alfalfa

穆文静;张永明;红格日其其格;

摘要(Abstract):

[目的]寻求操作简单、高效的苜蓿二胺氧化酶(DAO)纯化方法。[方法]苜蓿种子黑暗培养3 d,幼苗依次经硫酸铵沉淀,葡聚糖凝胶G-100(sephadex G-100),DEAE-纤维素以及羟基磷灰石(hydroxyapatite,HAP)层析分离纯化,最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳。[结果]最佳分段盐析的硫酸铵饱和度为20%~50%。经一系列层析分离后酶液比活力达84.67 U/mg,回收率为26%。经非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳后,出现1个蛋白质条带,相对分子质量约为110 k Da。而在变性聚丙烯酰氨凝胶电泳后,出现2个蛋白质条带,相对分子质量约为55和40 k Da。[结论]苜蓿DAO是由2个大小不同的亚基组成的异源二聚体。

关键词(KeyWords): 苜蓿;二胺氧化酶;分离纯化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(31360214);; 内蒙古教育厅项目(NJZY13054)

作者(Author): 穆文静;张永明;红格日其其格;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2017.28.048

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