安徽农业科学

2009, v.37;No.287(34) 16757-16759+16768

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枯草杆菌重组水蛭素的分离纯化工艺研究
Studies on the Separation and Purification of Recombinant Hirudin Variant 3 from the Bacillus Subtilis

陈华友;齐向辉;耿旭;徐庆刚;

摘要(Abstract):

[目的]优化枯草杆菌重组水蛭素的分离纯化工艺。[方法]采用系列预处理、初步层析和精细纯化试验。[结果]优化的分离纯化工艺为:发酵液经离心、三氯乙酸处理、超滤浓缩脱盐,再上阴离子交换柱,或用乙醇处理后贮存,为离子交换备用。初步层析介质用阴离子交换QSepharoseF.F.,缓冲体系为Tris-HCl(pH值8.0),体系电导率为6.0mS/cm,上样量为240.0ATU/ml介质,产品纯度为70.2%,回收率达90.0%。用SephacrylSi-100凝胶过滤柱精细纯化水蛭素,在一定流速范围内,流速对纯化效果影响不大,上样量可为10.0ml,得到的纯品纯度可达95.1%,得率为93.0%,SDS-PAGE电泳为单一条带。[结论]可为进一步工业化分离纯化水蛭素研究提供借鉴。

关键词(KeyWords): 水蛭素;枯草杆菌;离子交换;分离纯化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家“863”项目(2006AA03Z0453);; 江苏省高校自然科学研究项目(09KJB230001);; 国家“973”项目(2009CB724700);; 江苏-大学校基金项目(08JDG009)

作者(Author): 陈华友;齐向辉;耿旭;徐庆刚;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.34.020

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