安徽农业科学

2006, (24) 6460-6462+6464

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轮状病毒外壳抗原蛋白VP4基因转化苎麻的研究
Study on the Transformation of Rotavirus Coat Epitope Protein Gene VP4 into Boechmeria nivea L.Guad

孔华;郭安平;郭运玲;刘恩平;章霄云;贺立卡;

摘要(Abstract):

利用套叠PCR技术对轮状病毒外壳抗原蛋白VP4基因进行了定点突变,将改造后的基因插入pBI121构建植物表达载体。在设计PCR引物时,引入植物表达载体pBI121具有的克隆位点BamH I和Sac I,利用BamH I和Sac I切除pBI121上的GUS基因并使载体质粒线性化,用同样的2种酶消化pTVP4克隆载体获得VP4基因片段,使之形成与线性化pBI121质粒相同的粘性末端。在T4DNA连接酶的作用下,将线性化pBI121质粒和酶切后的VP4基因片段连接成新的重组质粒pBI121/VP4,通过直接转化法转化到根癌农杆菌(Agrobacteriumefaciens)EHA105菌株中,获得农杆菌工程菌株。采用叶盘转化法转化苎麻(Boehmeria.nivea L.Guad)栽培品种圆叶青,以卡那霉素抗性作为转化植株的筛选标记获得抗性植株。经PCR、PCR Southernblot分析表明,初步获得了轮状病毒外壳蛋白VP4的转基因苎麻植株。

关键词(KeyWords): 轮状病毒;VP4基因;苎麻

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 海南省自然科学基金资助(30301)

作者(Author): 孔华;郭安平;郭运玲;刘恩平;章霄云;贺立卡;

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DOI:

参考文献(References):

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