安徽农业科学

2009, v.37;No.268(15) 6876-6878

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O型口蹄疫病毒VP1基因原核表达及蛋白纯化
Prokaryotic Expression and Protein Purification of O-type Foot-and-mouth Disease Virus VP1 Gene

舒黛廉;王珏;杜建华;

摘要(Abstract):

以O型FMDV重组质粒pMD18T-O-VP1为模板,利用PCR技术扩增得到O型FMDV-VP1基因片段,将此基因片段与原核表达载体pET32a连接构建重组表达载体pET32a-O-VP1,经PCR和测序鉴定后,用IPTG诱导VP1基因的表达,收集不同诱导时间的菌液,进行SDS-PAGE电泳,摸索掌握最佳诱导时间,切取最佳诱导时间电泳胶片做Western-blotting,分析检验表达产物与其抗血清的反应性。结果显示,分子量约为45 ku的蛋白条带反应显著,能被口蹄疫阳性血清识别,表明FMDV-VP1基因在大肠杆菌中得到高效表达,纯化复性的表达蛋白有望开发为诊断抗原和多肽疫苗。

关键词(KeyWords): 口蹄疫病毒;VP1基因;原核表达;蛋白复性

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 舒黛廉;王珏;杜建华;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.15.141

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