安徽农业科学

2016, v.44;No.538(33) 74-76+102

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间接酶联免疫吸附法测定大鲵凝集素
An Indirect Non-competitive Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Determination of Andrias davidianus Lectin

王晓龙;佟长青;李伟;

摘要(Abstract):

[目的]建立基于大鲵凝集素多克隆抗体酶联免疫定量分析的方法。[方法]以大鲵凝集素为抗原,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体,建立间接非竞争酶联免疫检测方法,并对该方法的精密度及准确度进行了测试。[结果]获得的抗血清效价为1∶16 000,多克隆抗体血清的最佳稀释度为1∶3 000,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔二抗最佳稀释度为1∶30 000,抗原浓度在31.25~1 000.00 ng/m L范围内呈良好的线性关系,相关系数R~2>0.99,板内及板间变异系数范围分别为2.50%~9.88%和2.69%~11.59%,回收率为91.5%~109.5%。分布结果显示,大鲵凝集素在躯干部肌肉组织中的含量较高。[结论]成功建立了大鲵凝集素间接非竞争酶联免疫检测方法,该方法灵敏度高,重复性好,可用于实际检测大鲵肌肉组织中的凝集素含量。

关键词(KeyWords): 大鲵;凝集素;酶联免疫;多克隆抗体

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然基金项目(31571916);; 大连海洋大学引进人才及在职培养博士启动项目(100914262)

作者(Author): 王晓龙;佟长青;李伟;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.33.024

参考文献(References):

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