安徽农业科学

2008, (07) 2798-2800

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烟草叶肉原生质体的简易制备及其在植物病毒研究上的应用
Simple Preparation of Tobacco Mesophyll Protoplasts and Its Application in Plant Virus Research

谢明根;陈集双;

摘要(Abstract):

[目的]探索获得植物原生质体高产、高活力的方法。[方法]以烟草品种X311叶片为试材,研究简易大量制备烟草叶肉原生质体的条件及其在植物病毒研究上的应用。[结果]在纤维素酶浓度为1.3%,离析酶浓度为0.4%,果胶酶浓度为0.1%,渗透压稳定剂甘露醇浓度为0.63 mol/L,酶解8 h的条件下制备烟草叶肉原生质体,将制得的原生质体经简易纯化或者不纯化直接经洗涤液洗涤3次后,可直接用于植物病毒的侵染试验。侵染后的原生质体培养24 h,提取病毒粒子,经SDS-PAGE可证明病毒发生增殖。该方法制备的烟草叶肉原生质体含细胞碎片和其他杂质少,在相同成本条件下原生质体产量是一般方法的5.69倍,活率要高出11.26个百分点。[结论]该方法对快速大量制备其他植物原生质体研究植物病毒具有参考价值。

关键词(KeyWords): 原生质体;简易纯化;游离;植物病毒

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 谢明根;陈集双;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.07.074

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