安徽农业科学

2021, v.49;No.664(03) 105-109

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丝瓜LcPPO1基因CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建
Construction of CRISPR/Cas9 Gene Editing Vector of LcPPO1 Gene in Luffa

陈敏氡;王彬;刘建汀;叶新如;曾美娟;朱海生;温庆放;康玉妹;

摘要(Abstract):

[目的]通过CRISPR/Cas9系统构建丝瓜LcPPO1基因编辑载体。[方法]根据前期已经克隆得到的LcPPO1基因序列,设计2个sgRNA靶位点序列,退火制备sgRNA双链,分别与线性PCA1301-Cas9载体连接获得2个重组载体,将重组载体转化DH5α感受态细胞,再对其进行PCR鉴定及测序比对分析。[结果]2个sgRNA靶位点序列已经分别准确地连入PCA1301-Cas9载体,插入序列无突变。[结论]成功构建了丝瓜LcPPO1基因编辑载体PCA1301-Cas9-sgRNA1和PCA1301-Cas9-sgRNA2,为后续研究丝瓜LcPPO1基因功能奠定了基础。

关键词(KeyWords): 丝瓜;LcPPO1基因;CRISPR/Cas9技术;基因编辑

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 福建省自然科学基金项目(2019J01112);; 福建省现代蔬菜产业技术体系岗位专家项目(2018R1026-5);; 福建省农业科学院科技创新团队建设项目(STIT2017-1-2);; 国家大宗蔬菜产业技术体系福州综合试验站项目(CARS-23-G-53);; 设施蔬菜种质收集及基因发掘、品种创新与产业化(2018NZ0002-3);; 福建省属公益类专项(2019R1031-2)

作者(Author): 陈敏氡;王彬;刘建汀;叶新如;曾美娟;朱海生;温庆放;康玉妹;

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