安徽农业科学

2012, v.40;No.375(14) 8099-8101

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猪繁殖与呼吸道综合征病毒荧光定量PCR检测方法的研究
Establishment of Fluorescent Quantitative PCR Assay by TaqMan Probe Approach for PRRSV Detection

郝贵增;付亮;张福良;李敬玺;

摘要(Abstract):

通过条件优化,以定量的10倍系列稀释的质粒pMD-ORF7为标准品,进行荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了PRRSV的荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μl;利用该方法对3份不同的组织样品进行重复性检测,计算出平均循环阈值的标准差分别为0.14、0.14和0.44,变异系数分别为0.01%、0.01%和0.02%,说明该方法具有良好的重复性和重现性。对阳性组织病料的检测表明,该方法与常规RT-PCR的阳性符合率为100%,但其检测灵敏度较常规RT-PCR约高100倍。

关键词(KeyWords): 猪繁殖与呼吸综合征病毒;荧光定量PCR;Taqman探针

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 河南省科技攻关重点项目(08050)

作者(Author): 郝贵增;付亮;张福良;李敬玺;

Email:

DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.14.136

参考文献(References):

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