安徽农业科学

2011, v.39;No.342(17) 10461-10463

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传染性法氏囊病病毒VP5蛋白跨膜区的敲除及可溶性原核表达研究
Knockout of IBDV VP5 Protein Transmembrane Region and the Soluble Prokaryotic Expression Research

严孝金;李锋;秦立廷;李倩倩;韩翠晓;冯舵;王笑梅;高伟;

摘要(Abstract):

[目的]构建敲除传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP5蛋白跨膜区序列的原核表达载体,并进行目的蛋白的表达、分离和纯化。[方法]利用PCR技术分别扩增IBDVVP5基因的胞外片段和胞内片段,然后将2个片段及pET-28b(+)同时相接,即载体-胞内片段-胞外片段-载体,构建了敲除跨膜区基因片段的VP5重组表达质粒pET-VP5-FC及改进后的pET-VP5-SC。将表达质粒转化BL21(DE3),IPTG诱导后经Ni亲和层析及凝胶过滤层析纯化重组蛋白。[结果]得到可溶性表达的IBDVVP5。[结论]为进一步研究VP5蛋白的结构与功能奠定了基础。

关键词(KeyWords): 传染性法氏囊病病毒;VP5;跨膜区敲除;原核表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(30970578,31070651);; 教育部“新世纪优秀人才支持计划”项目(NECT-08-0731)

作者(Author): 严孝金;李锋;秦立廷;李倩倩;韩翠晓;冯舵;王笑梅;高伟;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.17.020

参考文献(References):

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