安徽农业科学

2015, v.43;No.501(32) 89-92

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嵌合双串联OVA T细胞表位的RHDV VP60蛋白免疫特性研究
Immunogenicity of Chimeric RHDV VP60 Protein Carrying Double CD_8~+ T Cell Epitopes of OVA

宋艳华;张燕;胡波;范志宇;魏后军;刘星;黄兵;薛家宾;徐为中;王芳;

摘要(Abstract):

为研究RHDV VP60作为载体容纳外源片段以及递呈外源T细胞表位的能力,将双串联卵清蛋白T细胞表位插入N端、C端以及替代N端氨基酸的方式获得3种嵌合蛋白,进行免疫试验。3种嵌合蛋白分别命名为DN1、DN2和DC,将蛋白进行浓缩、纯化及定量,利用透射电镜观察VLPs的形成,发现均可形成形态大小与VP60相似的VLPs。将3种嵌合蛋白分别腹腔注射C57BL/6雌性小鼠,利用间接ELISA检测首免后0、4和6周小鼠血清样品中VP60特异性抗体,结果表明嵌合蛋白组与VP60组均能够诱导产生较高水平的抗VP60特异性抗体,2组间无显著差异。首免后6周,利用合成的OVA多肽刺激脾淋巴细胞,ELISPOT检测特异性IFN-γ的分泌水平,结果表明3种嵌合蛋白均能诱导特异性IFN-γ的分泌。该研究扩展了VP60作为载体可携带的外源片段的耐受性及有效递呈T细胞表位的能力,为VP60-VLPs展示系统的研究提供了理论依据。

关键词(KeyWords): RHDV;衣壳蛋白;OVA T细胞表位;嵌合蛋白;免疫原性研究

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 江苏省自然科学基金项目(BK20140740);; 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-44);; 山东省现代农业产业技术体系项目(SDAIT-18-011-06)

作者(Author): 宋艳华;张燕;胡波;范志宇;魏后军;刘星;黄兵;薛家宾;徐为中;王芳;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.32.030

参考文献(References):

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