安徽农业科学

2008, (29) 12622-12623+12626

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抗真菌活性肽段CGA-N46的免疫学鉴定及其高效表达条件研究
Study on the Immunological Identification and Highly-effective Expression of Antifungal Peptide CGA-N46

李瑞芳;薛雯雯;赵玉峰;

摘要(Abstract):

[目的]嗜铬粒蛋白Chromogranin AN端31-76位氨基酸组成的多肽CGA-N46具有较强的抗真菌活性,对其表达条件进行研究具有重要意义。[方法]将CGA-N46基因重组大肠杆菌BL21(DE3,pET-N46)接种于含有氨苄青霉素的2×YT培养基中,于37℃、230r/min振荡培养3 h后加入诱导剂IPTG至终浓度1 mmol/L,25℃条件下诱导6 h,离心收集菌体进行SDS-PAGE蛋白电泳。利用抗6-His的单克隆抗体进行免疫印迹,结果有免疫印迹条带,但表达量不高。鉴于此,对CGA-N46基因的表达条件进行了优化。[结果]在37℃下培养3 h后加入IPTG25℃诱导9 h,目的蛋白表达量较高,当诱导剂IPTG的浓度超过0.4 mmol/L时,其浓度的改变对目的蛋白的表达没有多大影响。

关键词(KeyWords): 嗜鉻粒蛋白A;CGA-N46;免疫印迹;表达条件

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 河南省重点科技攻关项目(0623030300);; 河南省自然科学研究指导计划项目(2006180006)

作者(Author): 李瑞芳;薛雯雯;赵玉峰;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.29.134

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