安徽农业科学

2011, v.39;No.345(20) 12223-12224

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

鸡新城疫病毒HN基因片段的原核表达及其单抗制备
Prokaryotic Expression of Chicken NDV-HN Gene Fragment and Preparation of Its Monoclonal Antibody

王贤;陈芳芳;余为一;

摘要(Abstract):

[目的]研究NDV-HN蛋白抗原表位在动物免疫应答中的作用特点。[方法]根据HN基因和载体pGEX-4T-1的多克隆位点自行设计1对引物,以该实验室保存的重组质粒为模板,进行PCR扩增,再将其所得片段定向插入pGEX-4T-1,构建重组质粒,并对该重组质粒进行鉴定;再将构建的重组质粒在大肠杆菌中表达;最后,鉴定了相应单克隆抗体。[结果]PCR结果表明,得到了与预期结果一致的长度为850 bp的片段;重组质粒鉴定结果表明,成功构建了包含目的基因片段的重组表达质粒pGEX-4T-HN23;重组质粒经原核表达获得大小为57 kD的融合蛋白,免疫Balb/c小鼠试验表明,用免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA筛选和3次亚克隆获得2株稳定传代(可传20代以上)和分泌抗NDV-HN抗体的杂交瘤细胞株。[结论]获得的鸡新城疫病毒HN单克隆抗体,为进一步研究HN在致病过程的作用及特异性诊断提供了重要试验材料。

关键词(KeyWords): 新城疫病毒;HN;原核表达;单抗

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然基金项目(30671537)资助

作者(Author): 王贤;陈芳芳;余为一;

Email:

DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.20.013

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享