安徽农业科学

2011, v.39;No.354(29) 17788-17789+17818

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甘草RAPD-PCR反应体系正交优化研究
Optimization of RAPD-PCR Reaction System for Glycyrrhiza uralensis Based on Orthogonal Design

张增福;董建力;李明;

摘要(Abstract):

[目的]建立一套适合甘草分子学研究的RAPD-PCR反应体系。[方法]以甘草种质为试材,采用正交试验法设计,对影响RAPD-PCR扩增的主要因素dNTPs、引物、Taq酶和DNA模板进行优化筛选。[结果]总体积25μl的甘草RAPD-PCR最佳反应体系为:10×PCR缓冲液(含MgCl2)2.5μl,10 mmol/L dNTPs 2.5μl,50 ng DNA 2.0μl,10μmol/L引物2.0μl,5 U/μl Taq酶0.4μl。对引物的退火温度进行了梯度筛选,34℃时扩增效果较好。[结论]进行甘草RAPD-PCR反应体系的正交优化非常有效。

关键词(KeyWords): 甘草;DNA;RAPD-PCR;反应体系;优化;正交试验

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家“十一五”支撑项目(2006BAI06A15-11)

作者(Author): 张增福;董建力;李明;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.29.171

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