安徽农业科学

2012, v.40;No.374(13) 7645-7649

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重组蛋白PACAP-PTD的制备及其活性鉴定
Preparation and Activity Identification of Recombinant PACAP-PTD

黄霖;余榕捷;李娟;刘晓飞;王静静;

摘要(Abstract):

[目的]制备重组蛋白PACAP-PTD,并对其活性进行鉴定。[方法]设计编码融合蛋白PACAP-PTD基因,克隆到表达载体pKYB,构建重组表达载体pKYB-PACAP-PTD,转化大肠杆菌ER2566中。采用IPTG诱导由PACAP-PTD、内含肽和几丁质组成的融合蛋白表达。利用IMPACT(Intein Mediated Purification with an Affinity Chitin-binding Tag)介导的纯化系统制备目的融合蛋白PACAP-PTD,并对其活性进行鉴定。[结果]试验所得的目的蛋白经测定分子量,结果与理论值相符,且试验中PACAP-PTD能有效的穿越血脑屏障。[结论]融合蛋白PACAP-PTD的构建和制备为其生物学功能的深入研究奠定了基础,同时可用于改善其用药途径,扩大其应用范围。

关键词(KeyWords): PACAP-PTD;PACAP;内含肽;FITC;血脑屏障;原核表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 东莞市科技计划项目(2008108101036)

作者(Author): 黄霖;余榕捷;李娟;刘晓飞;王静静;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.13.006

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