安徽农业科学

2008, (29) 12627-12628

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一种简捷有效的大肠杆菌感受态细胞制备方法
A Simple and Effective Method for Preparation of Escherichia coli Competent Cells

代红星;张庆桥;樊宝良;

摘要(Abstract):

[目的]探索建立简捷快速有效的大肠杆菌感受态细胞制备方法。[方法]在已有的TSS法基础上进行了进一步的改进,建立了一个只需一步室温离心便能够获得与常规方法效价相近,能够长期保存的大肠杆菌感受态细胞的制备方法。[结果]新方法制备的感受态细胞每微克转化菌落数达105~106个,可以满足在质粒中进行的常规克隆需要。不同冻存时间对新方法制备的感受态细胞转化效率无显著影响。新方法制备的感受态细胞可以立即使用也可以于-80℃下长期保存至少9个月不会影响其转化效价。这也与常规CaC l2法制备的感受态细胞性能相当。[结论]该方法为一次大量制备并长期保存使用感受态细胞奠定了基础。

关键词(KeyWords): 大肠杆菌;感受态细胞;CaCl2法;制备

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 代红星;张庆桥;樊宝良;

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