安徽农业科学

2009, v.37;No.v.37(23) 10895-10896

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抑制素质粒的提取与纯化研究
Study on Extraction and Purification of Inhibin Plasmid

杨维;石国庆;夏洁;张红琳;

摘要(Abstract):

[目的]为抑制素质粒的大量提取与纯化寻找一种成本低的方法。[方法]采用碱裂解法与DEAE-纤维柱层析法提取与纯化抑制素质粒DNA,用分光光度法测定其浓度和纯度。[结果]抑制素质粒DNA的等电点为2.0~2.5,低于大部分蛋白质。pH值为8.0时,抑制素质粒DNA带负电荷,且电荷数量与RNA和蛋白质不同。用紫外分光光度计测定的柱层析后洗脱峰1、2、3在260和280 nm波长处的吸光度值分别为3.01和2.9、0.95和0.51、0.84和0.76,其OD260 nm/OD280 nm分别为1.04、1.86和1.10。3 mol/LNaCl的洗脱峰1大部分是蛋白质,0.6 mol/LNaCl的洗脱峰2是浓度为93.0 ng/ml的抑制素质粒DNA,3 mol/LNaCl的洗脱峰3是杂质。[结论]利用碱裂解法能从大肠杆菌细胞中分离出抑制素质粒DNA,DEAE-纤维柱层析法纯化的抑制素质粒DNA达到了要求的纯度。

关键词(KeyWords): 质粒;提取;纯化;碱裂解法;DEAE-纤维柱层析

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 江苏省教育厅自然科学研究基金(06KJD1801)

作者(Author): 杨维;石国庆;夏洁;张红琳;

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