安徽农业科学

2009, v.37;No.269(16) 7332-7333+7369

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木霉几丁质酶和几丁寡糖的制备及提纯
Preparation and Purification of Trichodema Chitinase and Chitooligosaccharide

沈奕;伍万荣;高智谋;王革;

摘要(Abstract):

[目的]为木霉几丁质酶和几丁寡糖的开发应用提供必要的技术支持。[方法]由高产几丁质酶的木霉菌株YHS-1液体振荡培养得到木霉几丁质酶粗酶液,分别测定了木霉菌株YHS-1在不同时间、不同温度下的几丁质酶活值,优化木霉产酶条件。并研究了几丁寡糖的制备及提纯方法。[结果]供试木霉最佳产酶温度为35℃,最佳产酶时间为4 d,此时酶活值为55 U。几丁质酶粗酶液通过(NH4)2SO4分级沉淀、阴离子交换柱层析、SDS-PAGE提纯后可以达到层析纯,出现单一并且峰值很高的层析峰,电泳确认2条带,分别为几丁质外切酶和几丁质内切酶。几丁寡糖用初提纯的几丁质酶与过量的胶态几丁质反应得到粗溶液,再经过蛋白质沉淀和冷冻离心后得到纯化。[结论]建立了木霉几丁质酶和几丁寡糖的制备及提纯方法,为木霉几丁质酶和几丁寡糖的开发应用提供了必要的技术支持。

关键词(KeyWords): 木霉;几丁质酶;几丁寡糖;制备;提纯

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 安徽省教育厅自然科学重点项目(2006KJ057A)

作者(Author): 沈奕;伍万荣;高智谋;王革;

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