抗大肠杆菌耐热性肠毒素ST_1单克隆抗体的制备与鉴定Establishment and Identification of Monoclonal Antibodies against Enterotoxigenic Escherichia coli Heat-stable Enterotoxin Ⅰ
管翠萍;贾伟;陈萍萍;
摘要(Abstract)：
[目的]培养大肠杆菌耐热性肠毒素ST1单克隆抗体的细胞株,建立一种快速、灵敏、特异和便于临床操作的检测耐热性肠毒素ST1的方法。[方法]将制备的ST1包涵体与弗氏完全佐剂充分混匀,免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,然后用间接ELISA法筛选和有限稀释法进行细胞克隆。[结果]获得2株能稳定分泌抗ST1肠毒素单抗杂交瘤细胞株。[结论]将单克隆抗体与酶联免疫吸附实验两者相结合可有效获得所需的杂交瘤细胞株,为下一步临床检测奠定了基础。
关键词(KeyWords)： 有限稀释法;单克隆抗体;杂交瘤细胞株;间接ELISA
基金项目(Foundation):
作者(Author): 管翠萍;贾伟;陈萍萍;
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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.18.167
参考文献(References)：
- [1]李中兴,郑家齐,李家宏,等.诊断细菌学[M].香港:黄河文化出版社,1992:286-291.
- [2]JACQUESGM,FRANCOISEB,PIERRED,etal.Repliciontypingofviru-lence plasmids of enterotoxigenicEscherichia coliisolates from cattle[J].Infect Immun,1992,60(8):3376-3379.
- [3]徐兵,张兆山,李书琴,等.大肠杆菌肠毒素的基因融合及其免疫原性的研究[J].中国生物化学与分子生物学报,1999,15(6):903-906.
- [4]俞守义,陈清,陈义忠,等.产肠毒素大肠杆菌腹泻的临床特征[J].中华医学杂志,1994,74(2):115-116.
- [5]MARLEENMS,HALVORS,WING,etal.Detection of colonization factorantigen I-positive nterotoxigenicEscherichia coliwithcloned polynucleotideprobe[J].J Clin Microbiol,1990,28(10):2264.
- [6]许崇波,冯书章,刘子,等.大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ基因核苷酸序列分析与免疫原性研究[J].中国兽医学报,1996,16(4):327-332.
- [7]徐志凯.实用单克隆抗体技术[M].西安:陕西科学技术出版社,1992:43-45.
- [8]蒋琳,苏彩霞,沈心亮.抗-戊型肝炎病毒单克隆抗体的研制及应用[J].中华预防医学杂志,1998,32(3):174-176.
- [9]CLARKESC.DiarrhoeagenicEscherichia coli-an emergingproblem?[J].Diagn Microbiol Infect Dis,2001,41(3):93-98.
- [10]许崇波,冯书章.大肠杆菌耐热性肠毒素(ST)分子生物学研究进展[J].中国兽医杂志,1993,20(3):47-49.