安徽农业科学

2008, (18) 7862-7864+7888

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VEGFR1基因特异性siRNA的筛选
Screening of VEGFR1 specific siRNA for therapeutic application

李艳;张必良;

摘要(Abstract):

[目的]筛选血管内皮生长因子受体(VEGRF)基因特异性小干扰RNA(Small Interference RNA,siRNA),为肿瘤等疾病的基因治疗寻找一种新途径。[方法]以高表达VEGFR1的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)为模型,采用RNA干扰技术,化学合成了3条针对血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)的特异性siRNA,用Lipofectamine2000TM转染HUVEC细胞株,通过Real time RT-PCR技术检测HUVEC细胞VEGFR1基因mRNA的表达。并对效果最好的VEGFR1 siRNA-2进行siRNA的浓度梯度效果检测。[结果]结果表明,与对照组相比,所设计的3条siRNA均能不同程度地抑制VEGFR1 mRNA的表达,其中siRNA-2号最有效,浓度为50 nmol/L时抑制率达到95%左右。在浓度梯度试验中,VEGFR1 siRNA-2转染浓度为50 pmol/L时,对VEGFR1基因的沉默效果还能达到50%左右。[结论]所设计的siRNA能有效抑制VEGFR1基因的表达,为RNAi用于靶向VEGFR1的基因治疗提供了非常有效的siRNA序列。

关键词(KeyWords): RNA干扰;siRNA;人脐静脉血管内皮细胞;血管内皮生长因子受体;基因治疗

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家高技术研究发展计划资助项目(863计划)(2006AA-02Z191)资助课题

作者(Author): 李艳;张必良;

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参考文献(References):

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