蚓激酶F-Ⅲ-1基因植物表达载体的构建Construction of the Plant Expression Vectors for Lumbrokinase F-Ⅲ-1 Gene
陈臻毅;侯学文;苏志坚;邱道寿;
摘要(Abstract)：
[目的]探讨蚓激酶F-III-1基因在烟草中的高效表达。[方法]以经烟草密码子优化、人工合成的蚓激酶成熟肽F-III-1为目的基因,以p CAMBIA3301和p BA002质粒为基础,构建由35S启动子调控、抗草铵膦基因(bar)为选择标记的植物表达载体。[结果]成功构建了4个植物表达载体,分别是p CAMBIA3301-F-III-1、p CAMBIA3301-F-III-1-6x His、p BA002-F-III-1和p BA002-F-III-1-6x His。[结论]4个植物表达载体的成功构建为探讨蚓激酶在植物中的表达及其植物反应器生产奠定了基础。
关键词(KeyWords)： 蚓激酶;F-Ⅲ-1基因;植物表达载体
基金项目(Foundation): 广东省科技计划项目(2007B030700004)
作者(Author): 陈臻毅;侯学文;苏志坚;邱道寿;
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参考文献(References)：
- [1]MIHARA H,SUMI H,YONETA T,et al.A novel fibrinolytic enzyme extracted from the earthworm,Lumbricus rubellus[J].Jpn J Physiol,1991,41(3):461-472.
- [2]MIHARA H,SUMI H,AKAZAWA T,et al.Fibrinolytic enzyme extracted from the earthworm[J].Thromb Haemostas,1983,50:258-263.
- [3]RYU G H,PARK S,HAN D K,et al.Antithronbogenicity of lumbrokinaseimmobilized polyurethane[J].Biomedical Material Research,1994,28:1069.
- [4]黎明,宋馨宇,王晓娟,等.双顺反子翻译偶联表达载体的构建及蚓激酶基因F238在大肠杆菌中的可溶性表达[J].微生物学通报,2011(7):1056-1062.
- [5]赵明明,黎明,韩振林,等.蚓激酶基因的克隆及在毕赤酵母中的表达[J].微生物学报,2006(4):581-585.
- [6]沈悦,梁宏,孙兆军,等.蚯蚓纤溶酶PI239基因在杆状病毒中的表达[J].首都医科大学学报,2003(1):23-26.
- [7]刘殿峰,张嘉保,张守峰,等.蚓激酶重组逆转录病毒载体的构建及其在牛乳腺中的表达[J].中国兽医学报,2006(5):519-521.
- [8]张守峰,扈荣良,范志强,等.蚓激酶基因的人工合成及山羊乳腺表达[J].中国生物工程杂志,2004(9):49-52.
- [9]赵清.大豆生物反应器表达融合蛋白CTB-LK[D].天津:天津大学,2008.
- [10]杜希龙.生物融合蛋白CTB-LK在向日葵中的表达研究[D].天津:天津大学,2008.
- [11]田鹏.蚓激酶转基因苜蓿(Medicago sativa)及丹参(Salvia miltiorrhizae)的构建及检测[D].北京:中国农业科学院,2009.
- [12]朱永兴,曹鹏,许兴多,等.多基因表达载体KCTB转化宁夏枸杞的研究[J].中国农学通报,2010,26(9):74-77.
- [13]朱海生.草莓psy、pds和zds基因克隆及植物表达载体的构建[J].热带作物学报,2013,34(1):54-60.
- [14]谢铭.转基因植物作为生物反应器的新进展[J].广西农业科学,2002(2):95-97.
- [15]DANIELL H,STREATFIELD S J,WYCOFF K.Medical molecular farming production of antibodies,biopharmaceuticals and edible vaccines in plants[J].Trends Plant Sci,2001,6:219-226.
- [16]朱列书,赵松义,戴林建.烟草生物技术研究及在育种上的应用[J].作物研究,2004(S1):402-407.
- [17]ZUBKO E,SCUTT C,MEYER P.Intrachromosomal recombination between regions as a tool to remove selectable marker genes from tobacco transgens[J].Nat Biotechnol,2000,18(4):442-445.