安徽农业科学

2008, (29) 12619-12621

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橡胶延长因子基因的原核表达及其多克隆抗体的制备
Prokaryotic Expression of Rubber Elongation Factor Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibody

陈章权;吴坤鑫;梁晓东;黄震;陆田田;

摘要(Abstract):

[目的]制备橡胶延长因子重组蛋白及其多克隆抗体。[方法]用RT-PCR法扩增橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)编码区基因,将其克隆到原核表达载体pDEST17中,转化大肠杆菌BL21-AI,用L-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表达,并采用亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫小鼠制备多克隆抗体,并用ELISA和W estern blot对抗体效价和特异性进行鉴定。[结果]高效表达和纯化了橡胶延长因子重组蛋白,用其免疫家小鼠,获得了高效价的特异性多克隆抗体,W estern blot检测显示该抗体可识别胶乳中的天然橡胶延长因子。[结论]成功获得橡胶延长因子重组蛋白,制备了效价高、特异性好的鼠抗橡胶延长因子抗体,为进一步橡胶延长因子及其他橡胶粒子膜蛋白的生物学功能研究奠定了基础。

关键词(KeyWords): 橡胶延长因子;基因;表达;抗体;制备

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(30460021);; 中央级公益性研究院所基本科研业务费专项资金(ITBBD0717)

作者(Author): 陈章权;吴坤鑫;梁晓东;黄震;陆田田;

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参考文献(References):

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