安徽农业科学

2009, v.37(02) 519-521

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第28期鸡胚原始生殖细胞的分离培养
Isolation and Culture of Primordial Germ Cells of Chicken Embryo at 28th Stage

丁志丽;采克俊;刘莉;张易祥;张念慈;

摘要(Abstract):

[目的]进一步优化生殖细胞(PGCs)细胞体外培养条件。[方法]从第28期(5.5 d)鸡胚生殖嵴分离PGCs,将PGCs与性腺基质细胞共培养进行原代培养,比较2种培养温度和3种培养浓度对PGCs原代培养的影响,以及2种饲养层细胞对PGCs传代培养的影响,并通过倒置显微镜下形态学观察、碱性磷酸酶(AKP)和过碘酸希夫反应(PAS)染色方法鉴定PGCs。[结果]培养浓度为2.5×105个/m l和培养温度为37℃时PGCs增殖较多,不易分化,存活能力较强,以第2代鸡胚成纤维细胞作饲养层时传代培养效果较好,获得了PGCs增殖的未分化集落,为后期的细胞标记及移植研究提供了较多数量和较高活力的PGCs。[结论]获得了PGCs原代与传代培养较好的培养体系,为禽类EG细胞系的建立和转基因研究奠定了基础。

关键词(KeyWords): 鸡胚;原始生殖细胞;培养

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30500270);; 浙江省自然科学基金项目(Y304194);; 湖州师范学院校级课题(KX23027);; 浙江省教育厅科研项目(20070479)

作者(Author): 丁志丽;采克俊;刘莉;张易祥;张念慈;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.02.132

参考文献(References):

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