安徽农业科学

2011, v.39;No.336(11) 6338-6342+6404

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蜡梅nsLTPs基因家族4个成员的原核表达研究
Prokaryotic Expression of Four Genes from nsLTP Family in C.praecox

刘群;张倩;眭顺照;李名扬;

摘要(Abstract):

[目的]利用现代分子生物学技术探索蜡梅(Chimonanthus praecox)资源的药用价值。[方法]在有关蜡梅生物学特性研究基础上,构建蜡梅非特异性脂转移蛋白(nsLTP)基因家族4个成员(GenBank登录号:FJ889521、FJ904082、FJ904083、FJ904084)的原核表达载体CpLTP1-pET、CpLTP2-pET、CpLTP3-pET、CpLTP4-pET,并对诱导温度、IPTG浓度和诱导表达时间等条件进行了优化。[结果]在1.0mmol/L IPTG、37℃常规诱导条件下诱导6 h可获得高效表达,总表达产率可达到细菌全蛋白质总量的50%以上,包涵体表达远高于可溶性蛋白的表达;在0.5 mmol/L IPTG、28℃条件下诱导6 h能够获得较好的可溶性表达,利用His-Bind蛋白纯化回收试剂盒获得4个纯化的重组蛋白。[结论]成功构建蜡梅nsLTP的原核表达载体,转化大肠杆菌Origami2(DE3)获得4个纯化的重组蛋白,可为后续的抗菌抗病毒活性研究提供研究材料,并为蜡梅资源药用价值的开发提供研究思路。

关键词(KeyWords): 蜡梅;非特异性脂转移蛋白;原核表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 重庆市自然科学基金项目(CSTC,2006BB1336);; 重庆市教委应用基础研究项目(KJ060308)

作者(Author): 刘群;张倩;眭顺照;李名扬;

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