安徽农业科学

2016, v.44;No.514(09) 168-170

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荧光定量PCR检测猪肝中猪链球菌2型的基因组DNA提取方法的比较
Comparison of Genome DNA Extraction Methods of Streptococcus suis Type 2 from Pig Liver by Fluorescent Quantitative PCR Detection

凌淑萍;赵健;陈国;叶宇飞;许秀琴;吕燕;吴银良;

摘要(Abstract):

[目的]在人工布菌猪肝中评估溶菌酶-苯酚法和柱式纯化试剂盒法提取猪链球菌2型基因组DNA在荧光定量检测中的应用效果,为猪链球菌2型的荧光定量检测选择合理的基因组DNA提取方法提供试验依据。[方法]采用溶菌酶-苯酚法和柱式纯化试剂盒法分别提取人工布菌猪肝样本中猪链球菌2型基因组DNA,通过荧光定量PCR技术检测猪链球菌2型的相对含量。[结果]利用荧光定量方法能够检测到猪链球菌2型。该方法可以最低检测到12 CFU/g的猪链球菌,特异性良好,标准曲线方程为y=-3.185 9x+39.901 0。在人工布菌猪肝样本中,溶菌酶-苯酚法在q PCR实验中检测猪链球菌2型较灵敏。[结论]溶菌酶-苯酚法在猪肝样品中提取基因组DNA效果较好;试剂盒法在细菌纯培养物中提取基因组DNA具有安全、高效等优点。

关键词(KeyWords): 猪链球菌2型;基因组DNA;qPCR检测

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 宁波市农科教结合项目(2015NK24)

作者(Author): 凌淑萍;赵健;陈国;叶宇飞;许秀琴;吕燕;吴银良;

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