肉牛肌生成抑制素成熟蛋白编码序列的克隆与原核表达Cloning and Prokaryotic Expression of the Coding Sequence of Maturation Protein of Bovine Myostatin Gene
左明坤;沈冰蕾;倪洪波;
摘要(Abstract)：
[目的]原核表达肉牛肌生成抑制素成熟蛋白编码序列基因并进行功能验证,为后期的小鼠接种实验打下基础。[方法]采用RT-PCR方法扩增肉牛MSTN成熟蛋白编码序列基因,该扩增产物经过双酶切后克隆到表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后采用SDS-PAGE和Western-blot检测重组目的蛋白的表达结果。[结果]经Anti-His-Tag鉴定正确。[结论]肉牛MSTN成熟蛋白编码序列基因在原核表达系统中得到正确表达。
关键词(KeyWords)： 肉牛;肌生成抑制素;克隆;原核表达;生物活性
基金项目(Foundation):
作者(Author): 左明坤;沈冰蕾;倪洪波;
Email:
DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.29.217
参考文献(References)：
- [1]MCPHERRON A C,LAWLER A M,LEE S J,et al.Regulation of skeletalmuscle mass in mice by a new TGF-βsuperfamily member[J].Nature,1997,387(6628):83-89.
- [2]MCPHERRON A C,LEE S J.Double muscling in cattle due to mutationsin the myostatin gene[J].Proc Natl Acad Sci USA,1997,94(23):12457-12461.
- [3]MCPHERRON A C,LEE S J.Genebank1997.Accession:AF-019623[DB/OL].http://www.ncbi.nlm.nih.gov/.
- [4]DANEAU I,SILVERSIDES D W.Genebank1998.Accession:AF-033855.[DB/OL].http://www.ncbi.nlm.nih.gov/.
- [5]CASAS E.Assoication of the musclar hypeertrro-phylocus with carcasstraits in beef cattle[J].Animal Science,1998,76:467-473.
- [6]RODGERS B D,WEBER G M,SULLIVAN C V,et al.Isolation and char-actedzation of myostatin complementary deoxyribonucleic acid clones fromtwo commercially important fish:Or-eochromis mossambicus and Moronechrysops[J].Endocrinology,2001,142(4):1412-1418.
- [7]欧阳红生,孙燕,张永亮,等.猪肌生成抑制素基因的克隆和序列测定[J].中国兽医学报,2001,21(5):479-481.
- [8]张锐,孙美榕,张红莲,等.猪各组织器官内肌生成抑制素基因mRNA表达谱的研究[J].中国兽药杂志,2004(3):16-18.
- [9]徐英,李石友,李琦华,等.蛋白质水平对牛肉肌苷酸含量的影响[J].西南农业学报,2011(1):294-296.
- [10]于仙萍,杨骞.对泾源县草畜产业跨越式发展的思考[J].内蒙古农业科技,2010(4):27-28.
- [11]高小艳,王长法,刘顺德,等.高表达牛气管防御素的真核重组载体的构建及其鉴定[J].西南农业学报,2010(6):2066-2069.
- [12]刘斌,马志强,买英龙.肉牛的快速育肥技术[J].内蒙古农业科技,2008(6):121.
- [13]朱玉霞,王玉涵,李钟淑,等.不同受体胞质对延边黄牛体细胞核移植效率的影响[J].西南农业学报,2011(1):286-288.
- [14]温立斌,何孔旺,杨汉春,等.类猪圆环病毒因子P1感染对猪红细胞的影响[J].内蒙古农业科技,2009(2):46-48.