安徽农业科学

2009, v.37;No.280(27) 12955-12956+12983

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一株分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞的鉴定
Identification of a Strain of Hybridoma Cell Secreting the Monoclonal Antibody against Porcine IFN-γ

张敬梅;余为一;李林;张春玲;

摘要(Abstract):

[目的]应用杂交瘤技术获得稳定分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。[方法]先将原核表达产物His-PoIFN-γ免疫BALB/c小鼠4次,然后进行细胞融合,再以纯化的GST-PoIFN-γ作为包被抗原,用间接ELISA筛选阳性杂交瘤无性系,最终获得能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对其进行间接ELISA和Western blot检测。[结果]试验获得1株能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,被命名为B3株,经间接ELISA和Western blot检测,该株分泌的抗体能与融合蛋白His-PoIFN-γ和GST-PoIFN-γ发生特异性反应,而与其他表达鸡γ-干扰素、His和GST蛋白等的重组质粒均不发生反应。B3株分泌的抗体小鼠腹水的ELISA效价达到1∶160 000,抗体亚型为IgG1型,且轻链为κ链。[结论]该研究为建立猪γ-干扰素检测方法,研究机体的免疫状态及免疫机制提供了技术基础。

关键词(KeyWords): 猪γ-干扰素;融合蛋白;单克隆抗体;制备;鉴定

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 安徽省科技攻关项目(04013042)资助

作者(Author): 张敬梅;余为一;李林;张春玲;

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参考文献(References):

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