安徽农业科学

2008, (18) 7595-7596+7604

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鸟传染性支气管炎病毒类木瓜蛋白酶基因的克隆和表达
Cloning and Expression of Papain-like Gene from Avian Infectious Bronchitis Virus

袁宁;王汉屏;王艳;

摘要(Abstract):

[目的]为探究鸟传染性支气管炎病毒(IBV)的感染和复制过程及其防治提供信息和途径。[方法]以鸟IBV的cDNA为模板,利用PCR技术克隆IBV类木瓜蛋白酶基因。将回收片段与pGEX-6p-1载体连接并转入大肠杆菌DH5α中。在IPTG诱导下将克隆的重组质粒在大肠杆菌BL21中进行表达,经纯化获得目标蛋白。[结果]克隆的类木瓜蛋白酶基因全长为924 bp,编码308个氨基酸的完整开放读码框。它与Genbank中IBV M41毒株类木瓜蛋白酶基因的序列完全一致,证实该基因为IBV的类木瓜蛋白酶基因。在IPTG诱导下,BL21菌株成功表达目标基因和GST融合蛋白,融合蛋白约为60 kD。经纯化和酶切后所得蛋白产物的分子量约为34 kD。[结论]该基因的成功克隆和表达为有关蛋白结构与功能的研究奠定了基础。

关键词(KeyWords): 鸟传染性支气管炎;非结构蛋白;类木瓜蛋白酶;克隆;表达;SDS-PAGE

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 陕西省教育厅科研计划项目(07JK182)

作者(Author): 袁宁;王汉屏;王艳;

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