安徽农业科学

2009, v.37;No.271(18) 8370-8372

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拮抗链霉菌AFLP分析技术体系的研究
Studies on the Technological System for AFLP in Antagonistic Strains from Streptomyces

金来武;刘伟成;潘争艳;裘季燕;刘学敏;

摘要(Abstract):

[目的]探索基于AFLP的拮抗链霉菌DNA模板制备方法及其扩增体系,为AFLP技术在链霉菌乃至放线菌资源分析中的应用提供依据。[方法]以改进的CTAB法提取DNA,利用PstⅠ/MseⅠ型AFLP试剂盒及其反应体系进行扩增,采用5%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析扩增结果。[结果]提取了10个拮抗链霉菌菌株的基因组DNA,0.8%琼脂糖凝胶电泳检测显示其主带清晰,片段大小为37.64~40.86 Kb,无降解现象,亦无RNA残留;其OD260/OD280为1.625~1.833;PstⅠ/MseⅠ双酶切产物琼脂糖电泳呈弥散荧光长带,说明酶解充分;筛选出的3对引物对DNA模板的扩增谱带清晰,多态性丰富。[结论]该研究建立的DNA模板制备方法及其扩增反应体系可用于链霉菌的AFLP分析。

关键词(KeyWords): 拮抗链霉菌;DNA提取;AFLP

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(30671346);; 北京市自然科学基金项目(6072010);; 北京市科技计划项目(D0706005000091)

作者(Author): 金来武;刘伟成;潘争艳;裘季燕;刘学敏;

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