安徽农业科学

2009, v.37;No.284(31) 15163-15166

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珍稀濒危植物大果木莲ISSR-PCR反应体系的建立
Establishment of ISSR-PCR Reaction System for the Rare and Endangered Plant Manglietia grandis Hu et Cheng

毛云玲;陈少瑜;韩燕;吴涛;司马永康;郝佳波;付玉嫔;

摘要(Abstract):

[目的]建立高效稳定的大果木莲ISSR-PCR反应体系。[方法]以珍稀濒危植物大果木莲新鲜嫩叶为材料,在高盐沉淀法提取高质量基因组DNA的基础上,通过ISSR-PCR反应体系中5个主要因素的单因子梯度试验,优化并最终建立了大果木莲稳定而高效的ISSR-PCR反应体系和反应程序。[结果]试验建立的大果木莲的ISSR-PCR反应体系为:20.0μl反应体系中含10×buffer2.0μl、Mg2+2.0 mmol/L、Taq酶0.5 U、DNA模板40 ng、引物0.8μmol/L、dNTPs0.2 mmol/L和ddH2O13.3μl,其反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,50~60℃退火45 s,72℃延伸2 min,40个循环;72℃完全延伸7 min。[结论]该研究为进一步揭示大果木莲群体的遗传多样性和遗传结构状况以及制定科学的保护措施提供了理论依据。

关键词(KeyWords): 珍稀濒危植物;大果木莲;基因组DNA;ISSR-PCR反应体系

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 云南省自然科学基金项目(2006C0066M)

作者(Author): 毛云玲;陈少瑜;韩燕;吴涛;司马永康;郝佳波;付玉嫔;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.31.141

参考文献(References):

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