安徽农业科学

2015, v.43;No.483(14) 30-32+39

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甜瓜CmERFIV-5基因cDNA的克隆·表达分析及载体构建
Cloning,Expression Analysis and Vector Construction of the CmERFIV-5 Gene cDNA from Melon(Cucumis melo L.)

金乌云;邵琪;郝鑫;鲍牧兰;哈斯阿古拉;

摘要(Abstract):

[目的]研究甜瓜Cm ERFIV-5基因的克隆、表达分析及超表达和RNAi载体构建。[方法]根据Gen Bank上登录的甜瓜一个乙烯应答因子(ethylene responsive facter,ERF)基因c DNA序列(登录号:MELO3C024315)设计合成特异性引物。应用RT-PCR技术从甜瓜品种河套蜜瓜(Cucumismelo L.cv.Hetao)成熟果实中克隆得到该基因c DNA序列,命名为Cm ERFIV-5,分析了该基因在甜瓜根、茎、叶及果实发育过程中的表达特性,将其构建到过量表达载体p PZP221中,得到重组植物表达载体p PZP221-Cm ERFIV-5。同时,构建了该基因RNAi载体p ART-27-Cm ERFIV-5。[结果]序列分析显示,所克隆的c DNA长度为808bp,编码255个氨基酸。荧光实时定量PCR分析表明,Cm ERFIV-5基因在甜瓜根、茎、叶及不同发育时期的果实中均有表达,在叶片中表达量最高。[结论]构建了Cm ERFIV-5基因的过量表达载体与RNAi载体,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

关键词(KeyWords): 甜瓜;乙烯应答因子;乙烯;表达;CmERFIV-5

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(31360486)

作者(Author): 金乌云;邵琪;郝鑫;鲍牧兰;哈斯阿古拉;

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参考文献(References):

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