安徽农业科学

2009, v.37;No.v.37(22) 10421-10423

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农杆菌介导紫花苜蓿子叶遗传转化的影响因素研究
Study of Influencing Factors on Genetic Transformation Efficiency of Medicago sativa L.Cotyledon Mediated by Agrobacterium

曲静;王丕武;杨金慧;

摘要(Abstract):

以5~7 d的紫花苜蓿无菌苗为材料进行卡那霉素抗性筛选,用RG-2质粒(含VP7基因和卡那霉素抗性基因)和农杆菌(EHA101、EHA105)构建重组质粒,对无菌苗和重组质粒进行共培养,研究菌株类型、菌液浓度对转化效率的影响。结果表明,菌株EHA105对紫花苜蓿的转化率达4%,重悬菌液的OD600以0.3~0.5为宜,农杆菌侵染时间以10~12 m in较好;PCR检测结果表明,37株卡那霉素抗性植株中30株为阳性,说明VP7外源基因已整合到受体植物基因组中。

关键词(KeyWords): 农杆菌;紫花苜蓿;遗传转化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 曲静;王丕武;杨金慧;

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