安徽农业科学

2011, v.39;No.344(19) 11480-11481+11487

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大麦黄矮病毒运动蛋白形成同型二聚体的功能研究
Functional Analysis of Homodimer Formation between Movement Protein of Barley Yellow Dwarf Virus

赵阳;曲宇杰;刘国富;曹雪松;

摘要(Abstract):

[目的]利用荧光双分子互补技术研究大麦黄矮病毒运动蛋白(BYDV-PAV,MP)形成二聚体的可能性,并研究MP同型二聚体与病毒运动之间的关系。[方法]将双分子荧光互补载体中包含多克隆位点、35S启动子及终止子的DNA片段构建到拷贝数较高的植物表达载体pCAMBIA1300上,然后以BYDV-PAV的全长cDNA为模板,根据GenBank中登记的BYDV-MP的基因序列设计引物,通过PCR扩增得到目的基因片段BYDV-MP,克隆到经过改造的双分子荧光互补载体pCAMBIA1300-NE、pCAMBIA1300-CE上,得到了重组的双分子荧光互补载体。电击转化农杆菌,利用农杆菌渗透注射技术注射到烟草叶片,荧光显微镜下观察植物体内的蛋白互作现象。[结果]农杆菌渗透注射后,2~5d观察双分子荧光互作现象,MP蛋白互作组及正对照组叶片产生黄色荧光,负对照组未有荧光现象。[结论]BYDV-MP在植物体内形成同源二聚体,该研究结果为深入开展BYDV运动过程和机理等研究提供了依据。

关键词(KeyWords): 双分子荧光互补;同型二聚体;渗透注射;荧光

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(30870109)

作者(Author): 赵阳;曲宇杰;刘国富;曹雪松;

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DOI:

参考文献(References):

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