安徽农业科学

2014, v.42;No.434(01) 20-23

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拟南芥中Fibrillarin基因的克隆·表达·纯化及与ak6蛋白相互作用研究
Cloning,Expression,Purification and Interaction with ak6 Research of Fibrillarin in Arabidops thaliana

李然;田兆丰;张飞云;

摘要(Abstract):

[目的]研究拟南芥中Fibrillarin基因的克隆、表达及纯化,并探索其与ak6蛋白的相互作用。[方法]利用pGEX-6P-1与Fibrillarin基因构建重组表达质粒,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,运用同样方法构建PET-28a-ak6原核表达质粒,获得His-ak6融合蛋白,并运用体外pull down技术验证二者的相互作用。[结果]在温度为37℃、诱导时间为16~20 h、IPTG浓度为0.5mmol/L时,fibrillarin蛋白的纯化浓度最高。试验成功获得了符合标准的RNA,并获得了与预期片段大小相符的清晰的目的条带;pulldown试验结果表明,拟南芥中fibrillarin蛋白与ak6蛋白具有相互作用。[结论]拟南芥ak6突变体植株可能由于ak6的缺失影响了rRNA前体的加工,从而抑制核糖体的合成,进而阻碍拟南芥茎的生长,使植株表现明显的矮小症状。

关键词(KeyWords): 拟南芥;fibrillarin蛋白;ak6

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(31071075)

作者(Author): 李然;田兆丰;张飞云;

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参考文献(References):

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