安徽农业科学

2008, (20) 8466-8469

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尾叶桉U6 4CL基因cDNA克隆及反义表达载体的构建
Molecular Cloning of Fin-leaf Eucalyptus 4CL cDNA Fragment and Constructing of Antisense Expression Vectors

孔华;郭安平;郭运玲;刘恩平;贺立卡;

摘要(Abstract):

[目的]为了获得桉树4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)基因,构建植物反义表达载体,研究4CL基因对木质素的调控机理。[方法]从尾叶桉U6幼茎组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增得到1.4 kb cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy。[结果]测序结果表明,该基因1413 bp,编码471个氨基酸。克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pBI121上,构建成4CL反义基因表达载体。通过冻融法将携带反义cDNA的植物表达载体质粒导转入根癌农杆菌EHA105,得到完整的Ti质粒表达载体系统。[结论]为该基因转化桉树的主栽品种尾叶桉U6以降低其木质素含量奠定了基础。

关键词(KeyWords): 尾叶桉;4CL基因;反义表达载体

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30700515);; 海南省自然科学基金(80668)

作者(Author): 孔华;郭安平;郭运玲;刘恩平;贺立卡;

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