安徽农业科学

2013, v.41;No.402(05) 1918-1919+1927

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重组NADH氧化酶对乳酸脱氢酶乳酸氧化活性的影响
Effects of Recombinant NADH Oxidase on the Lactate Oxidation Activity of Lactate Dehydrogenase

赵蕊;霍贵成;

摘要(Abstract):

[目的]考察当存在其他利用NADH途径时,发酵型乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)催化乳酸氧化能力的改变。[方法]PCR扩增乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)中生成H2O的NADH氧化酶基因noxE,将其连接至表达载体并在大肠杆菌中过量表达;对亲和纯化的产物进行SDS-PAGE分析、光谱扫描和活性测定,考察纯化产物是否具有生物学活性;以2,4-二硝基苯肼法测定乳酸脱氢酶的乳酸氧化活性,考察添加NoxE重组蛋白对其活性的影响。[结果]重组NoxE蛋白是种黄素蛋白,具明显的生物学活性,说明noxE表达载体构建成功;添加NoxE后,LDH的乳酸氧化活性提高了3.84倍。[结论]在NADH经呼吸链代谢掉的生理条件下,LDH催化乳酸氧化的能力会明显提高。

关键词(KeyWords): 乳酸菌;乳酸脱氢酶;NADH氧化酶

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家863项目(2011AA100902);; 国家自然科学基金(31171717和30972131)

作者(Author): 赵蕊;霍贵成;

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