安徽农业科学

2010, v.38;No.326(34) 19272-19274

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辣椒RAPD扩增体系的建立
Research on the Establishment of RAPD Amplification Program of Hot Pepper

谢立波;郭亚华;孟凡娟;刘录祥;王雪;高永利;

摘要(Abstract):

[目的]为辣椒的品种资源鉴定与遗传多样性分析奠定基础。[方法]采用改良的CTAB法对辣椒叶片基因组DNA进行提取,并采用正交试验设计法对辣椒RAPD-PCR反应进行优化筛选。[结果]采用改良的CTAB法获得了高质量的辣椒基因组DNA,用Tris-平衡酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1,V∶V∶V)进行抽提,最后再用氯仿抽提以除去其中含有的酚,避免了对后续PCR扩增的影响。基于一般的RAPD反应程序和调整试验,优化了PCR反应体系。结果表明,在模板20 ng 1.5μl、引物(20μmol/L)1.5μl、dNTPs(2.5 mmol/L)2.2μl、10×Buffer缓冲液(含Mg2+)2.5μl、Taq(5 U/μl)0.35μl条件下扩增效果较好。[结论]建立了最适的辣椒RAPD扩增体系。

关键词(KeyWords): 辣椒;RAPD;优化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家863(2007AA100104-);; 航天育种工程项目(2006HT-20012);; 黑龙江省科技攻关项目(GB06B111-4);; 黑龙江省自然基金项目(ZD200818-01)

作者(Author): 谢立波;郭亚华;孟凡娟;刘录祥;王雪;高永利;

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