牛羊肉中肠出血性大肠杆菌O_(157):H_7的检测Detection of Escherchia coli O_(157):H_7 from Beef and Mutton
王晓红;应兰;李增魁;
摘要(Abstract)：
[目的]为青海省部分地区市售的羊肉、牛肉进行了大肠杆菌O157:H7的检测。[方法]样品先用mEC肉汤增菌,然后在选择性培养基TC-SMAC培养,再根据GenBank上已发表的大肠杆菌O157:H7rfbE、fliC和eacA抗原基因的保守序列设计3对引物,进行多重PCR鉴定,将可疑菌接种于MUG-LST,进行微量生化试验鉴定。[结果]在各1株牛、羊肉分离菌中多重PCR同时扩增出了大小为678、560和368 bp的3条特异性条带,分离菌的生化反应特性符合大肠杆菌的特征。[结论]在羊、牛肉各1份样品中检出了E.coli O157:H7。
关键词(KeyWords)： 大肠杆菌O157:H7;分离与培养;多重PCR;rfbE基因;fliC基因;eacA基因;生化鉴定
基金项目(Foundation): 青海大学大学生科技创新基金(2011-QX-28)
作者(Author): 王晓红;应兰;李增魁;
Email:
DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.32.163
参考文献(References)：
- [1]RILEY L W,REMIS R S,HELGERSON S D,et al.Hemorrhagic colitis as-sociated with a rare Escherichia coli serotype[J].N Engl J Med,1983,308:681-685.
- [2]权太淑,徐建国,范天锐,等.首次从出血性结肠炎病人中分离到O157∶H7大肠杆菌[J].中华流行病学杂志,1988,9(4):24-27.
- [3]KRAUSE U,THOMSON-CARTER F M,PENNINGTON T H.Molecularepidemiology of Escherichia coli O157∶H7 by pulsed-field gel electro-phoresis and comparison with that by bacteriophage typing[J].J Clin Mi-crobiol,1996,34:959-961.
- [4]DO Y,LE M P.Isolated of Escherichia Coli O157∶H7 from retail fresh meatspoultry[J].APPI Ehriron Mocripiol,1987,53:23-27.
- [5]SLUTSKER L,RIES A A,GREENE K D,et al.Escherichia coli O157∶H7diarrhea in the United States;clinical and epidemiologic features[J].AnnIntern Med,1997,126(7):505-513.
- [6]吴家林,肖勇,凌霞,等.肠出血性大肠杆菌O157∶H7多重PCR快速检测研究[J].现代预防医学,2009,36(1):117.
- [7]王刚,唐守亭,张卓然,等.大肠埃希氏菌O157及其检验[J].微生物学杂志,2003,20(1):52-54.
- [8]R.E.布坎南,N.E.吉本斯.伯杰细菌鉴定手册[K].8版.北京:科学出版社,1984:388.
- [9]李增魁,马兰,种伟雄.西宁市售动物性食品中肠出血型大肠杆菌O157∶H7的检测[J].中国动物检疫,2011,28(7):56-59.
- [10]NAGANO I,KUNISHIMA M,ITOH Y,et al.Detection of verotoxin produ-cing Escherichia coli O157∶H7 by multiplex polymerase chain reaction[J].Microbiol Immunol,1998,42:371-376.
- [11]GANNON V P,D'SOUZA S D,GRAHAM T,et al.Use of the flagellar H7gene as a target in multiplex PCR assays and improved specificity in iden-tification of Enterohemorrhagic Escherichia coli strains[J].J Clin Micro-biol,1997,35:656-662.
- [12]中华人民共和国卫生部.肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染性腹泻监测方案(试行)[EB/OL].http://www.doc88.com/p_872813095490.html.
- [13]TU S I,PATTERSON D,BRIGGS C,et al.Detection of immunomagneti-cally captured Escherichia coli O157∶H7 by antibody-conjugated alkalinephosphatase[J].Journal of Industrial Microbiology&Biotechnology,2001,26:345-349.
- [14]叶青,史明坤,刘波,等.河北省O157:H7大肠杆菌病原学和流行病学研究[J].中国公共卫生,2000,16(7):613-614.