安徽农业科学

2010, (22) 11732-11734

[打印本页] [关闭]
本期目录 | 过刊浏览 | 高级检索

真核表达载体pcDNA3.1(+)-vp28的构建及其在细胞中的表达
Construction of Eukaryotic Expression Vector pcDNA3.1(+)-vp28 and Its Expression in Cell

姜坤;黄健;张峥;成君军;石正丽;刘庆慧;

摘要(Abstract):

[目的]为研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白与虾细胞之间的作用机制奠定基础。[方法]采用PCR扩增方法构建含白斑综合征病毒囊膜蛋白VP28的真核表达重组载体pcDNA3.1(+)-vp28,用磷酸钙共沉淀法将重组质粒转染到293T细胞中,采用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物。[结果]VP28的PCR扩增产物在琼脂糖凝胶电泳中呈现出1条634bp左右的条带,与GenBank中vp28的序列完全一致。对pcDNA3.1(+)-vp28转染后的阳性单克隆菌落进行PCR鉴定、扩大培养和质粒提取,并对所得质粒进行HindⅢ和BamⅢ双酶切,获得了5409和610bp左右的2条带,与预期结果一致;所获扩增产物与vp28序列完全一致,说明重组质粒pcDNA3.1(+)-vp28被成功转染到293T细胞中;SDS-PAGE和Westernblot检测结果显示,pcDNA3.1(+)-vp28在293T细胞中的表达产物与预期结果相符。[结论]pcDNA3.1(+)-vp28在293T细胞中可成功表达VP28。

关键词(KeyWords): WSSV;vp28;细胞转染;293T细胞

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家重点基础研究发展计划课题(2006CB101801);; 国家高技术发展计划(863计划)课题(2006AA100312);; 公益性行业(农业)科研专项经费项目(200803012);; 国家虾现代产业技术体系(nycytx-46)共同资助

作者(Author): 姜坤;黄健;张峥;成君军;石正丽;刘庆慧;

Email:

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享