安徽农业科学

2017, v.45;No.560(19) 126-129

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莱茵衣藻MAPK4基因RNAi载体的构建及鉴定
Construction and Identification of MAPK4 Gene RNAi Vector of Chlamydomonas reinhardtii

王子贺;邓晓东;张阳;费小雯;

摘要(Abstract):

[目的]构建莱茵衣藻2A38的MAPK4基因的RNAi载体。[方法]提取莱茵衣藻细胞总RNA,利用PCR扩增出编码MAPK4的基因片段,用基因工程技术将MAPK4基因片段连接载体p MD18-T上,经过2次不同的双酶切后,与RNAi中间载体p T282连接,最后连接到干涉载体p Maa7IR/XIR上,用酶切及测序鉴定MAPK4基因RNAi载体并转化莱茵衣藻。[结果]经限制性内切酶酶切及测序鉴定,证实为重组质粒,并且该重组载体可在莱茵衣藻中表达。[结论]构建的MAPK4基因RNAi载体结构正确,为进一步利用RNAi技术使MAPK4基因沉默表达,研究MAPK4在莱茵衣藻中的生物学功能奠定了试验基础。

关键词(KeyWords): 莱茵衣藻;MAPK4基因;RNAi

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 王子贺;邓晓东;张阳;费小雯;

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