安徽农业科学

2018, v.46;No.598(21) 119-121

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拟南芥SSP1基因GFP载体构建及GFP植株筛选
Construction of Arabidopsis SSP1-GFP Vector and Identification of Transgenic Lines

吴席;樊婷婷;方雪;徐洁娜;曹树青;

摘要(Abstract):

[目的]以野生型拟南芥为材料构建SSP1基因GFP载体及GFP转基因植株。[方法]通过提取野生型拟南芥的RNA,反转录成为c DNA,并以c DNA为模板,利用高保真酶,进行SSP1基因的克隆,将克隆所获得SSP1基因和p XB94-GFP质粒进行双酶切,利用T4-DNA ligase进行连接,并转化进大肠杆菌DH5α感受态细胞中,通过菌落PCR和测序获得阳性单克隆。通过质粒抽提试剂盒提出构建好的重组质粒,并将其转入农杆菌GV3101中,通过菌落PCR鉴定出阳性单菌落。将获得的阳性菌通过花序浸染法转入野生型拟南芥中,并通过抗性筛选获得阳性植株。[结果]克隆SSP1基因成功,菌落PCR显示SSP1基因成功连接到p XB94-GFP质粒上并成功转入农杆菌中,抗性筛选获得了SSP1-GFP转基因植株。[结论]成功获得SSP1-GFP转基因植株,为接下来进一步研究SSP1基因功能奠定了基础。

关键词(KeyWords): 拟南芥;SSP1;载体;GFP转基因植株

Abstract:

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基金项目(Foundation):

作者(Author): 吴席;樊婷婷;方雪;徐洁娜;曹树青;

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