安徽农业科学

2011, v.39;No.348(23) 14059-14061+14064

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研究土壤微生物多样性的PCR条件优化
Optimization of PCR Condition in Soil Microbial Diversity Study

邸宁;刘志民;马焕普;

摘要(Abstract):

[目的]对PCR-DGGE法的试验条件进行优化,以更好地分析土壤微生物遗传多样性。[方法]改良高盐法提取土壤DNA,改进引物设计,改变PCR反应过程中退火温度、扩增体系,比较PCR扩增结果。[结果]经过改良的高盐法提取的土壤微生物DNA效果更好。PCR扩增选择20μl体系条带单一,易于操作。退火温度选择在55℃时无非特异性扩增,35个循环次数易于后续DGGE分析。[结论]已经优化的PCR基因扩增体系特异性高且稳定可靠。

关键词(KeyWords): PCR-DGGE;土壤微生物;多样性

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 北京市教委资助项目(KM200910020001)

作者(Author): 邸宁;刘志民;马焕普;

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