安徽农业科学

2012, v.40;No.366(05) 2570-2573

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用正交设计法优化臭椿SRAP-PCR反应体系
Optimization for ISSR Reaction System of Ailanthus altissima by Orthogonal Design

郭旭琴;游庆方;汪贵斌;曹福亮;黄广远;仓湘斐;章霞;

摘要(Abstract):

[目的]确定臭椿SRAP-PCR反应条件,为进一步研究臭椿SRAP分子标记提供依据。[方法]以新疆吐鲁番3号和江西臭椿叶片DNA为材料,利用引物组合EM1-EM8进行SRAP-PCR反应的L16(45)正交试验,建立了臭椿SRAP-PCR反应体系,新复极差法对体系进行方差分析,并对体系的稳定性进行检测。[结果]确定臭椿SRAP-PCR反应体系为:模板DNA 2.5 ng/μl、Mg2+1.75 mmol/μl、dNTPs0.3 mmol/μl、Taq酶0.3 U/μl、引物0.6μmol/μl、10×PCR Buffer 2.5μl;该体系稳定,适用于臭椿的SRAP反应。[结论]该试验优化的SRAP反应体系,将为臭椿种质资源多样性评价、分子标记,以及遗传连锁图谱构建奠定基础。

关键词(KeyWords): 臭椿;SRAP-PCR;体系优化;正交设计

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 江苏省林业三新工程LYSX(2009)39

作者(Author): 郭旭琴;游庆方;汪贵斌;曹福亮;黄广远;仓湘斐;章霞;

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