一种改进大肠杆菌DH5α转化效率的方法A Method to Improve the Transformation Efficiency of E.coli DH5α
杜红旗;李晨阳;田璐;
摘要(Abstract)：
[目的]提高大肠杆菌DH5α转化效率。[方法]在其他条件一致的情况下,将5μl的质粒或连接产物加入含有100μl的感受态0.2 ml PCR管和1.5 ml的离心管中,0.2 ml PCR管设置热休克时间梯度和1.5 ml的离心管热休克时间90 s,对大肠杆菌DH5α转化效率进行了比较。[结果]0.2 ml PCR管转化效率高于1.5 ml的离心管,且0.2 ml PCR管热休克30 s时最高。[结论]采用此方法提高了大肠杆菌DH5α的转化效率。
关键词(KeyWords)： 离心管;感受态;CaCl2;热休克;转化
基金项目(Foundation):
作者(Author): 杜红旗;李晨阳;田璐;
Email:
DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.22.030
参考文献(References)：
- [1]COHENS N,CHANG AC,HSUL.Nonchromosomal antibiotic resistancein bacteria:genetic transforrnation ofEscherichia coliby R-factor DNA[J].Proc Natl Acad Sci USA,1972,69(8):2110-2118.
- [2]COHENSN,CHANGAC,BOYERHW,etal.Construction of biologicalyfunctional bacterial plasmidin vitro[J].Proc Natl Acad Sci USA,1973,70(11):3240-324.
- [3]王立良,王淼,陈连凤,等.冷冻复苏法高效转化大肠杆菌[J].生物技术通讯,2002,13(3):194-195.
- [4]令利军,朱艳,王红梅,等.保存时间及温度对大肠杆菌感受态转化效率的影响[J].生物技术通讯,2004,15(1):51-52.
- [5]李路怡,易建华,李敏.大肠杆菌最佳感受态细胞制备的探讨[J].生命科学研究,1998,2(3):194-198.
- [6]张卫林,赵晶,李芬.冰浴时间对氯化钙转化法转化效率的影响[J].安徽农业科学,2007,35(30):957.