安徽农业科学

2008, (24) 10365-10367+10370

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白木香基因组DNA的提取及ISSR反应条件的优化
Extraction of Genomic DNA and Optimization of ISSR Reaction Condition for Aquilaria sinensis(Lour.) Gilg

贾文杰;李恩香;杨柏云;刘东晓;

摘要(Abstract):

[目的]以白木香为试验材料,研究基因组DNA提取方法,并优化ISSR-PCR反应体系。[方法]利用快速提取仪和微量液氮法提取DNA,并对ISSR-PCR反应体系进行单因素筛选。[结果]微量液氮法提取的DNA质量好于快速提取仪,但2种方法得到的DNA对后续ISSR研究没有明显的差异。同时,建立了最适的白木香ISSR-PCR体系,即25lμPCR反应体积中,1×PCR buffer,2.0 mmol/L MgCl2,4ng/μl模板DNA,200μmol/L dNTPs,1.1 UTaqDNA聚合酶,0.4μmol/L引物。最佳扩增程序为:94℃预变性5 min,然后进行45个循环,94℃变性45 s,复性温度根据各引物的TM值略低1~2℃,45 s,72℃延伸75 s,循环结束后72℃延伸7 min。[结论]优化系统的建立为进一步利用ISSR分子标记技术进行白木香遗传多样性研究提供了基础。

关键词(KeyWords): 白木香;DNA提取;ISSR分子标记

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广东省东莞市中小企业创新基金项目

作者(Author): 贾文杰;李恩香;杨柏云;刘东晓;

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DOI:

参考文献(References):

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