安徽农业科学

2009, v.37;No.266(13) 5886-5888

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抗HepG2核糖体展示抗体库的构建
Construction of Anti-HepG2 Ribosome Display Library

周雷;毛伟平;冯娟;刘洪云;魏传静;李文秀;周凤云;

摘要(Abstract):

[目的]构建鼠源抗HepG2核糖体展示抗体库。[方法]以培养的HepG2肝癌细胞4次免疫Balb/c小鼠,取脾脏分离总RNA,逆转录合成第一条链,PCR扩增重链可变区和轻链k,经linker DNA连接形成VH/k核糖体展示抗体库。将VH/k与pMD18-T载体的连接产物转化E.coli TG1,蓝白斑筛选,挑取白色菌落,提取质粒,PCR鉴定,并测序。[结果]VH和k链得到正确的扩增,长度分别为399和647bp,VH/k连接产物正确,连接产物长度为1 093 bp。[结论]所采用的引物及反应条件能够扩增出目的基因,成功构建了鼠源抗HepG2核糖体展示抗体库,为进行核糖体展示体外筛选抗HepG2特异性单链抗体奠定基础。

关键词(KeyWords): 核糖体展示;单链抗体;肝癌;抗体库

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 江苏省教育厅自然科学基金(08KJD350002)

作者(Author): 周雷;毛伟平;冯娟;刘洪云;魏传静;李文秀;周凤云;

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